納米顆粒跟蹤分析儀是一種基于納米顆粒跟蹤分析(NTA)技術(shù)的高精度物理性能測試儀器,主要用于測量納米顆粒的粒徑、濃度及Zeta電位等多參數(shù)信息。該儀器通過激光照射納米顆粒懸浮液,利用高分辨率顯微鏡捕捉顆粒的布朗運動軌跡,并結(jié)合專用軟件分析粒徑分布。其核心在于通過追蹤單個顆粒的隨機運動,結(jié)合斯托克斯-愛因斯坦方程,推算出顆粒的流體力學半徑,實現(xiàn)高精度測量。部分儀器還集成了微電泳技術(shù),可同步測定Zeta電位,反映顆粒表面電荷特性。
為確保測量結(jié)果的準確性和可靠性,
納米顆粒跟蹤分析儀使用前的準備工作至關(guān)重要。以下是關(guān)鍵步驟:
1、樣品準備
分散介質(zhì)選擇:
根據(jù)樣品性質(zhì)選擇合適的分散介質(zhì)(如超純水、生理鹽水、乙醇等),確保介質(zhì)與樣品相容且無反應(yīng)。
對于生物樣品(如細胞外囊泡、蛋白質(zhì)復合物),需使用等滲緩沖液(如PBS)維持滲透壓和pH穩(wěn)定性。
樣品稀釋與過濾:
將樣品稀釋至最佳濃度范圍(通常10??~10??g/mL),避免濃度過高導致顆粒重疊或多重散射。
使用濾膜(如0.22μm或更小孔徑)過濾樣品,去除雜質(zhì)、聚集體或大顆粒干擾。
超聲/攪拌處理:
通過超聲(10-30分鐘)或磁力攪拌均勻分散樣品,避免顆粒團聚。注意控制超聲功率,防止樣品降解或氣泡引入。
2、儀器檢查與校準
儀器預(yù)熱與自檢:
提前開機預(yù)熱(約30分鐘),確保激光光源、檢測器和流體系統(tǒng)穩(wěn)定。
執(zhí)行儀器自檢程序,檢查光路、流速和軟件連接是否正常。
校準操作:
光學校準:使用標準樣品(如已知粒徑的聚苯乙烯納米球)驗證儀器精度,調(diào)整激光強度和檢測閾值。
流速校準:若儀器配備流動池,需調(diào)節(jié)流速(通常0.5-5 mL/min)并檢查鞘液(如超純水)供應(yīng)是否穩(wěn)定。
折射率設(shè)置:輸入樣品和分散介質(zhì)的折射率(需提前通過文獻或阿貝折光儀測定)。
3、測量參數(shù)設(shè)置
模式選擇:
根據(jù)需求選擇測量模式:動態(tài)光散射(DLS)用于粒徑分布,納米顆粒跟蹤分析(NTA)用于單個顆??梢暬蜐舛确治?。
參數(shù)配置:
設(shè)置溫度(通常25℃)和測量時間(如DLS需足夠時間采集相關(guān)函數(shù))。
調(diào)整相機曝光時間和幀率,確保顆粒運動軌跡清晰可追蹤。
設(shè)定分析閾值(如信噪比>10),排除噪聲干擾。
4、環(huán)境與耗材準備
環(huán)境控制:
確保實驗室溫度穩(wěn)定(±1℃),避免氣流或振動干擾測量。
清潔操作臺面,防止灰塵污染樣品或儀器。
耗材檢查:
使用無塵紙或?qū)S霉ぞ咔鍧嵄壬?流動池,避免指紋或劃痕影響光路。
更換新鮮鞘液(如超純水),確保流動系統(tǒng)潔凈。
5、預(yù)實驗驗證
空白對照:
測量分散介質(zhì)的背景信號,確認無雜散光或氣泡干擾。
樣品預(yù)測試:
注入少量樣品進行預(yù)測試,觀察粒徑分布和濃度是否合理。若結(jié)果異常(如粒徑過大或過?。?,需重新處理樣品或調(diào)整參數(shù)。
6、數(shù)據(jù)管理與記錄
信息錄入:
輸入樣品名稱、濃度、批次號等基本信息,便于數(shù)據(jù)追溯。
方法保存:
保存校準參數(shù)和測量條件(如流速、溫度、折射率),建立標準化操作流程(SOP)。
